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配置PCR液時的注意方法

配置PCR液時的注意方法 | 時間: May-15 16:47:49 | 分類:技術欄目

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    在做克隆鑒定的時候經常需要在酶切鑒定前進行PCR鑒定,每次配置PCR反應液很繁瑣,可以將其配置類似kit的形式,按你需要的反應體系列表,然后放大100倍配置100×主反應液(100次反應),其中含buffer,Mg2+,dNTPs,但不含引物和Taq酶,然后可以10×分裝或一管儲存在-20度,在需要的時候拿出融開,然后按所需的PCR反應個數吸取相應的倍數,再補加相應反應倍數的Taq和引物,混勻后分裝,這樣做的好處如下:

  (1)可極大的節省寶貴的時間,可早點收工,看球;
  (2)避免每次反應加樣不均的可能;
  (3)大大減少PCR假陽性的產生。

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