熒光顯微鏡的使用方法和特點
熒光顯微鏡的使用方法和特點 | 時間: December-4 18:30:49 | 分類:技術(shù)欄目
凌儀生物提供高速離心機，美國Bio-rad伯樂電泳，德國eppendorf艾本德移液器，美國ABI基因擴增儀PCR，雅培原位雜交儀，Thermo熱電離心機等實驗室儀器設(shè)備，以及Corning康寧，Axygen愛思進(jìn)，Greiner格瑞拉等耗材要省錢，別錯過哦。熒光顯微鏡在短波長光波(紫外光或紫藍(lán)色光,波長250～400nm)照射下，某些物質(zhì)吸收光能，受到激發(fā)并釋放出一種能量降級的較長的光波(藍(lán)、綠、黃或紅光，波長400～800nm)，這種光稱熒光。某種物質(zhì)在短光波照射下即可發(fā)生熒光，如組織內(nèi)大部分脂質(zhì)和蛋白質(zhì)經(jīng)照射均可發(fā)出淡藍(lán)色熒光，稱為自發(fā)性熒光。但大部分物質(zhì)需要用熒光染料(如吖啶橙、異硫氰酸熒光素等)染色后，在短光波照射下才能發(fā)出熒光。
熒光顯微鏡的光源為高壓汞燈，發(fā)出的紫外光源經(jīng)過激發(fā)濾光片(此濾光片可通過對標(biāo)本中熒光物質(zhì)合宜的激發(fā)光)過濾后射向普勒姆氏分色鏡。分色鏡將激發(fā)光向下反射,通過物鏡投射向經(jīng)熒光染料染色的標(biāo)本。染料被激發(fā)并釋放出熒光,通過物鏡,穿過分色鏡和目鏡即可進(jìn)行觀察。目鏡下方安置有屏障濾片(只允許特定波長的熒光通過)以保護(hù)眼眼及降低視野暗度。
熒光顯微鏡的特點是靈敏度高，在暗視野中低濃度熒光染色即可顯示出標(biāo)本內(nèi)樣品的存在，其對比約為可見光顯微鏡的 100倍。30年代熒光染色即已用于細(xì)菌、霉菌等微生物及細(xì)胞、纖維等的形態(tài)觀察和研究。如用抗酸菌熒光染色法可幫助在痰中找到結(jié)核桿菌。40年代創(chuàng)造了熒光染料標(biāo)記蛋白質(zhì)的技術(shù)，這種技術(shù)現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于免疫熒光抗體染色的常規(guī)技術(shù)中，可檢查和定位病毒、細(xì)菌、霉菌、原蟲、寄生蟲及動物和人的組織抗原與抗體，可用以探討病因及發(fā)病機理，如腎小球疾病的分類及診斷，乳頭瘤病毒與子宮頸癌的關(guān)系等。在醫(yī)學(xué)實驗研究及疾病診斷方面的用途日益廣泛。
