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電泳儀使用方法及注意事項

電泳儀使用方法及注意事項 | 時間: September-11 16:04:18 | 分類:技術(shù)欄目

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   1.電泳儀通電進入工作狀態(tài)后,禁止人體接觸電極、電泳物及其它可能帶電部分,也不能到電泳槽內(nèi)取放東西,如需要應先斷電,以免觸電。同時要求儀器必須有良好接地端,以防漏電。

2.儀器通電后,不要臨時增加或撥除輸出導線插頭,以防短路現(xiàn)象發(fā)生,雖然儀器內(nèi)部附設(shè)有保險絲,但短路現(xiàn)象仍有可能導致儀器損壞。

3.由于不同介質(zhì)支持物的電阻值不同,電泳時所通過的電流量也不同,其泳動速度及泳至終點所需時間也不同,故不同介質(zhì)支持物的電泳不要同時在同一電泳儀上進行。

4.在總電流不超過儀器額定電流時(較大電流范圍),可以多槽關(guān)聯(lián)使用,但要注意不能超載,否則容易影響儀器壽命。

5.某些特殊情況下需檢查儀器電泳輸入情況時,允許在穩(wěn)壓狀態(tài)下空載開機,但在穩(wěn)流狀態(tài)下必須先接好負載再開機,否則電壓表指針將大幅度跳動,容易造成不必要的人為機器損壞。

6.使用過程中發(fā)現(xiàn)異常現(xiàn)象,如較大噪音、放電或異常氣味,須立即切斷電源,進行檢修,以免發(fā)生意外事故。

研發(fā)背景

1937年,瑞典生化學家Tiselius集前人百余年探索電泳現(xiàn)象之大成,發(fā)明了Tiselius電泳儀,在此基礎(chǔ)上建立了研究蛋白質(zhì)的自由界面電泳方法,利用該法首次證明人血清是由白蛋白(A)、Αβγ球蛋白組成,并因此于1948年獲得阿果獎。隨后電泳技術(shù)的發(fā)展突飛猛進,1949年,RicketlsMarrack等人證明人血清蛋白質(zhì)經(jīng)電泳分離可依次分為白蛋白,Α1α2βγ球蛋白五個組分,1957Reiner對人血清五個組分蛋白進行了定量分析。

但自由界面電泳沒有固定支持介質(zhì),擴散和對流作用較強,影響分離效果,于是在50年代相繼出現(xiàn)了固相支持介質(zhì)電泳。較初的支持介質(zhì)是濾紙和醋酸纖維素膜,目前這些介質(zhì)在實驗室已經(jīng)應用較少。在很長一段時間里,小分子物質(zhì)如氨基酸、多肽、糖等通常用濾紙、纖維素或硅膠薄層平板作為介質(zhì)進行電泳分離、分析,但目前一般使用靈敏度更高的技術(shù)如高效液相色譜法(HPLC)等來進行分析。而對于復雜的生物大分子,以濾紙、硅膠或醋酸纖維素膜等作為支持介質(zhì)進行電泳,其分離效果并不理想。于是1959年,RaymondWeintraub,DavisOrnstein先后利用人工合成凝膠作支持介質(zhì)建立了聚丙烯酰胺凝膠電泳,從而大大提高了電泳的分辨率和分離效果,增強了電泳技術(shù)的發(fā)展、滲透及與其他技術(shù)結(jié)合配套的能力。致使各式各樣的電泳技術(shù)和電泳材料如雨后春筍、競相爭榮,成為當代實驗科學技術(shù)中品種繁多、應用廣泛、基礎(chǔ)與尖端技術(shù)皆備的大技術(shù)。

根據(jù)電泳中是否使用支持介質(zhì)分為自由電泳和區(qū)帶電泳。

自由電泳不使用支持介質(zhì),電泳在溶液中進行。這類電泳又分為非自由界面電泳和自由界面電泳兩類。非自由界面電泳指懸浮在溶液中的帶電粒子(如各種細胞)通電后全部移動,不出現(xiàn)界面,如顯微電泳等。自由界面電泳中被分離物質(zhì)集中在某一層,形成各自的界面而進行定性或定量分析。自由界面電泳需要昂貴精密的電流儀器,僅在少數(shù)特殊電泳如等電聚焦電泳和等速電泳中使用。

區(qū)帶電泳都使用支持介質(zhì),根據(jù)支持介質(zhì)不同分為濾紙電泳、醋纖膜電泳、薄層電泳和凝膠電泳等。此外,根據(jù)支持介質(zhì)的裝置形式不同又可分為水平板式電泳、垂直板式電泳、垂直盤狀電泳、毛細管電脈、橋形電泳和連續(xù)流動電泳等

 

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