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PCR擴增產物克隆的實驗要點

PCR擴增產物克隆的實驗要點 | 時間: June-2 14:46:48 | 分類:技術欄目

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    引物設計主要是要注意以下幾個事項:

  (1)發夾結構;
  (2)反向配對;
  (3)GC含量(40-60%);
  (4)退火溫度(45-65度);
  (5)引物長度(18-27bp);
  (6)3' 端較好是C、G(提高結合度);
  (7)引物在序列中的錯配位點。
  大致就這幾個方面,重要性依次降低,由其是3' 端絕對不能形成發夾結構。那么你說你這段能不能設計引物呢?其實設計引物都只是好中選優的問題。

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