實(shí)驗(yàn)中提取質(zhì)粒DNA時(shí)的注意點(diǎn)
實(shí)驗(yàn)中提取質(zhì)粒DNA時(shí)的注意點(diǎn) | 時(shí)間: May-15 16:07:06 | 分類:技術(shù)欄目
凌儀生物提供高速離心機(jī)，美國(guó)Bio-rad伯樂電泳，德國(guó)eppendorf艾本德移液器，美國(guó)ABI基因擴(kuò)增儀PCR，雅培原位雜交儀，Thermo熱電離心機(jī)等實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備，以及Corning康寧，Axygen愛思進(jìn)，Greiner格瑞拉等耗材要省錢，別錯(cuò)過哦。 提取質(zhì)粒的時(shí)候，較后一步的酒精揮發(fā)很關(guān)鍵，基本上是其后續(xù)的酶切反應(yīng)的決定性因素。所以這一步盡量揮發(fā)長(zhǎng)一點(diǎn)時(shí)間，較好是空調(diào)吹熱風(fēng)，或是37度溫箱放長(zhǎng)一點(diǎn)的時(shí)間，我試過室溫過夜，酶切很好。
將amp濃度提高到200ug/ml，下班前接種，次日一早收獲菌體，此時(shí)OD雖然不高，質(zhì)粒豐度卻不一般。菌體量少些，操作體積（管數(shù)）也?。ㄉ伲?。
手提質(zhì)粒，如果用氛氯仿和氯仿兩步抽提，再注意一下手法，嚴(yán)格按照參考書上面的操作的話，提出的質(zhì)粒不比任何質(zhì)粒提取試劑盒差，我感覺好像還好一點(diǎn)，我就用過一次試劑盒，比較了之后不如我手提的好，以后再也沒用過了。
